Elementar 2023年11月份電子報 - 根據AOAC 998.12方法檢測蜂蜜的C4摻假

前言

蜂蜜是一種天然的、富含能量的產品，其純度很高，而《食品法典》（Codex Alimentarius）（2011）提供的定義是 - 不能在蜂蜜中添加其他任何物質或添加物。但是，隨著來自全球需求增長和蜜蜂數量減少的壓力越來越大，人們越來越有動機以欺詐方式銷售摻假蜂蜜。

數千年來，人們一直在欺詐性摻假蜂蜜，方法是在蜂蜜中添加甜味劑或加入玉米糖漿或蔗糖漿來完成的。這些糖漿因植物使用的光合作用機理而被稱為C4糖，其δ¹³C同位素值介於-12‰至-19‰之間。相反，蜂蜜是由C3植物生產的，其δ¹³C同位素值在-23‰至-28‰之間。

AOAC 998.12方法需要對蜂蜜樣品進行兩次分析，以檢測C4糖的摻假情況。 首先，必須從蜂蜜樣本中分離蛋白質。再使用EA-IRMS測定蛋白質和蜂蜜樣品的δ¹³C值。然後計算蛋白質分餾(Fraction)和蜂蜜樣品之間碳同位素比的差異，以確定蜂蜜是否已摻假。如果蛋白質分餾的碳同位素比率與整個蜂蜜樣品之間沒有明顯的差異，則可以認為蜂蜜是純淨的。

這部分可在官方AOAC手冊中找到執行AOAC998.12方法的完整指南，但簡要地講，該方法如下所述

方法

1.使用合適的過濾器除去蜂蜜中任何明顯量的固體。

2.在乾淨的50ml離心管中，向10-12 g蜂蜜中加入4 ml 純水，並充分混合。

3.加入2.0 ml 10％NaWO₄溶液和2.0 ml 0.335M H₂SO₄放入小試管中，混合，然後立即添加至蜂蜜溶液中，混合均勻。

4.在80°C水浴中旋轉試管，直到形成可見的絮狀物並形成上清液。 5.向試管中加水，混合，以1500 x g離心5分鐘，並取出上清液。

6. 每份50毫升水進行重複洗滌、混合和離心步驟5次，將顆粒徹底分散。

7.在75℃下乾燥蛋白質分餾物3小時。

分析

將乾燥的蜂蜜蛋白質樣品和整個蜂蜜樣品準製備成單個小錫囊。蛋白質和蜂蜜樣品應以一式三份製備。準備已知的δ¹³C值合適的內部實驗室標準品。將樣品放入元素分析儀的自動進樣器轉盤中，並使用EA-IRMS分析確定δ¹³C同位素比。

此分析屬展示練習，elementar原廠由從當地一家超市購買了幾種廠牌的蜂蜜成品，並使用BiovisION Honey穩定同位素配置方案在Elementar實驗室進行了分析，以檢測蜂蜜摻假。每個樣品皆以三重複分析。蜂蜜中C4糖的含量可使用以下公式：

蜂蜜被認為含有大量的C4糖，含量等於或高於7％。

表1.根據AOAC 998.12方法對不同商業販售的蜂蜜產品進行的EA-IRMS測量。

討論

AOAC 998.12方法提供了一種可靠的方法，用於檢測向蜂蜜中欺詐性添加C4糖的情況。使用BiovisION Honey EA-IRMS系統，可以快速執行分析，並且由於具有240位自動進樣器，可以按照順序分析大量樣品。該系統配備了direct Temperature Program Desorption（TPD ）氣體分離技術，使樣品進行多元素同位素分析變得相當簡單，當數據庫夠大時，進而可以同時推測蜂蜜產品的地理來源 (可使用ArDB軟體)。

BiovisION Honey EA-IRMS系統的主要特點是簡化分析並使儀器運作成本更低：

•使用灰燼收集器及單獨的燃燒和還原管可減少維護次數。

• Tool Free免工具的簡單日常維護，進一步減少了儀器的停機時間。

•具有睡眠/喚醒功能的完整軟體控制可降低氣體耗材成本。

•10年的高溫爐和TCD保固

資料來源:elementar官網